image: RUDN University biotechnologists have created a method for detection of bacterial infection in apple, pear, hawthorn and other plants of the Rosaceae family. The test does not require laboratory equipment, the result is ready in 10 minutes. This will allow detecting the disease quickly and prevent the spread of infection. view more
Credit: RUDN Unviersity
俄罗斯人民友谊大学的生物技术专家开发出一种可以检测苹果树、梨树、山楂树和蔷薇科其他植物中的细菌感染的方法。该测试在不需要使用实验室设备的条件下，就可在 10 分钟内得出结果。 这使得疾病能够被快速检测出来并防止其感染传播。 结果发表在生理学和分子植物病理学杂志上。
梨火疫病欧文氏杆菌会在植物中引起一种危险的传染病—梨火疫病。大多数蔷薇科植物易被感染——例如，山楂树、苹果树、梨树。由于细菌的侵害，花序会枯萎，叶子会变干和卷曲，树皮上会形成坏死性溃疡。 这种疾病可以通过受感染的植物、园艺工具和从疮口中携带液体的风进行传播。因此，为了及时阻止感染的传播，需要快速有效地诊断出疾病的方法。而现有的测试方法需要实验室设备-这会减慢诊断速度。俄罗斯人民友谊大学的生物技术专家开发了一种方法，可在 10 分钟内立即获得结果。 Shiatesa Razo（俄罗斯人民友谊大学农业与技术研究所博士）说到：“为了与梨火疫病菌进行抗争，在花园或苗圃中诊断该疾病非常重要，这对于监测疾病爆发或独立监测农场和私人花园尤其重要。因此，我们决定开发一种能快速检测出细菌的方法，并通过比较已受感染的植物的不同部分来优化该方法。”
新测试以免疫色谱(ICA)为依据进行分析 。 这是最通用的诊断方法之一，也用于妊娠试验或 SARS-CoV-2等大多数现代化快速测试中。将测试条放置在生物流体中，例如叶子萃取物。将特定抗体应用于“结合”所需物质并着色特定区域所获得条带上。根据它们的数量可以得出特定物质存在于生物体液中的结论。俄罗斯人民友谊大学生物技术专家的任务是选择抗体，以便确定植物汁液中是否存在梨火疫病菌。 为了获得特异性抗体，生物学家在家兔中进行了一系列的梨火疫病菌接种。 在最后一次接种疫苗后 7-10 天，生物学家从动物身上采集血液样本，并从中分离出必要的 IgG 免疫球蛋白（中和病原体的蛋白质细胞）。
最终的测试在沃罗涅日地区的121 个苹果树、梨树、山楂树、温柏树、野梅树和樱桃树这些受感染的植物上进行。从叶子、树枝、花、果实和细菌粘液中分离出测试液。因此， 93.5% 的快速检测结果与需要更多时间和特殊实验室设备的PCR 检测的结果一致。俄罗斯人民友谊大学的生物技术专家还确定最好使用具有导电性的植物组织进行分析，如木材和韧皮。 Shiatesa Razo（俄罗斯人民友谊大学农业与技术研究所博士）说到：“实验室和非实验室的快速和灵敏的分析方法越来越多。 但是，采样取决于病原体在植物中的分布方式。我们已经使用免疫色谱分析确定植物的哪些部分更适合检测梨火疫病。 因此，我们的结果将有助于在非实验室条件下更有效地诊断疾病。
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